Dados do Trabalho

Título

ISOLAMENTO E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE HEMAGLUTINANTE DA LECTINA PSIDIUM GUAJAVA AGLUTININA (PGA) EXTRAÍDA DAS FOLHAS DE GOIABEIRA (Psidium guajava L.)

Introdução

A goiabeira (Psidium guajava L.), família Myrtaceae, possui em suas folhas e semente diversos componentes, incluindo a lectina. Originada do latim “lectus”, que significa “selecionado” ou “escolhido”, as lectinas são glicoproteínas não imunológicas, capazes de ligar-se reversivelmente a um mono ou oligossacarídeo específico na superfície de hemácias, tendo a aglutinação dos eritrócitos como resposta. Sendo assim, objetivou-se extrair a lectina “Psidium guajava aglutinina” (PGA) das folhas de goiabeira, seguido pela avaliação pelo teste hemaglutinante (AE) em hemácias tipo B-.

Material e Métodos

Primeiramente, as folhas da goiabeira foram higienizadas com hipoclorito de sódio a 20 ppm/15 minutos e secas em estufa a 50 °C overnight. Secas, as folhas foram moídas e classificadas por tamis de 25 mesh. O farelo foi disperso em tampão fosfato de sódio (TFS) 20 mM (pH 11,5), na proporção de 1:10 (m.v-1). Em seguida, foi submetido a agitação mecânica por 60 minutos, à temperatura ambiente de (25 ± 2) °C. O extrato foi centrifugado a 4000 rpm/30 minutos à 4 °C, o sobrenadante foi recolhido e ajustado para pH 4,5 para induzir a precipitação proteica. O isolado proteico (IP) foi submetido a uma segunda centrifugação e o precipitado foi ressuspenso em água e pH ajustado para 7,0. O IP foi armazenado em temperatura de (-16 ± 2) °C. A AE da PGA foi determinada como a razão entre maior diluição de amostra que promoveu a aglutinação total de eritrócitos (HU) e a concentração de proteína no extrato (mg). Utilizou-se uma suspensão de hemácias (SH) do tipo B- a 5 % (v.v-1) e uma diluição seriada de base 212. O teste de hemaglutinação foi realizada em placa de ELISA onde 50 µL TFS 20 mM (pH 7,2), 50 µL da amostra e 50 µL da SH. O controle consistiu em 100 µL TFS 20 mM (pH 7,2) e 50 µL da SH.

Resultados e Discussão

Após 1 hora de incubação, observou-se uma reação positiva com HU de 128 e AE de 110,92 HU.mg-1.

Conclusão

Portanto, através do teste de hemaglutinação, comprovou-se a presença da lectina PGA no IP após a mesma se ligar aos sítios específicos na superfície das hemácias do tipo B-.