Dados do Trabalho

Título

METODOLOGIA PARA AUXÍLIO TERAPÊUTICO DE MICOSES CUTÂNEAS CAUSADAS POR ESPÉCIES DE Candida

Fundamentação/ Introdução

A levedura do gênero Candida é uma das mais frequentes causadoras de micoses de pele, sendo itraconazol (ITRA) ou fluconazol (FLUCO) por via oral os principais fármacos prescritos. Devido a resistência contra antifúngicos e o elevado custo para os testes de susceptibilidade, tem se proposto novas tecnologias acessíveis para a determinação da susceptibilidade de fungos. Nesse sentido, destaca-se a Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), técnica baseada na identificação de vibrações moleculares.

Objetivos

Desenvolver modelos de perfil de susceptibilidade a ITRA e FLUCO de espécies de Candida por FTIR.

Delineamento e Métodos

O presente trabalho foi um estudo experimental in vitro, que utilizou 67 isolados clínicos de Candida sp., identificados previamente por sequenciamento do DNA em: C. parapsilosis (26), C. albicans (13), C. tropicalis (10), C. guillermondii (7), C. glabrata (4), C. krusei (2), C. dubliniensis (2), C. lypolitica (1), C. metapsilosis (1) e C. orthopsilosis (1). Para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), foi utilizado o protocolo M27-Ed4 do Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI), e para a classificação em sensível (S), sensibilidade dose dependente (SDD) e resistente (R) para FLUCO, foram utilizados pontos de corte estabelecidos no protocolo M60-Ed1 do CLSI. Também, usou-se o protocolo M59-Ed3 do CLSI para classificar os isolados frente a ITRA, sendo considerados como wild-type (WT) quando não apresentam mecanismos de resistência, ou como non-wild-type (NWT), quando apresentam possivelmente algum mecanismo de resistência. Os espectros de FTIR foram adquiridos por Reflexão Total Atenuada (ATR) e a análise multivariada quantitativa foi realizada via regressão por Mínimos Quadrados Parciais com Correção de Sinal Ortogonal (OPLS).

Resultados

As médias geométricas (mínimo-máximo) de CIMs de ITRA e de FLUCO (µg/mL) foram 0,176 (0,0039-128) e 3,025 (0,0156-128), respectivamente. Para ITRA, 22,4% dos isolados foram classificados como NWT e 31,3% se mostraram resistentes para FLUCO. A conversão dos CIMs para log2 n foi necessária para obter erros de predição <0,3% para ambos os antifúngicos, permitindo a quantificação correta em toda a faixa de valores de CIM avaliados.

Conclusões/ Considerações Finais

Os dois modelos propostos de ATR/OPLS-ln2CIM para determinação de CIMs de ITRA e FLUCO para Candida sp. podem ser usados como alternativas limpas, economicamente viáveis e robustas em laboratórios de análises clínicas.

Palavras-Chave

FTIR. Candidíase. Susceptibilidade. Itraconazol. Fluconazol