Dados do Trabalho
Título
COMPARAÇAO ENTRE TECNICAS DE COLORAÇAO PARA A AVALIAÇAO MORFOLOGICA DE ESPERMATOZOIDES HUMANOS.
Fundamentação/Introdução
Ao longo dos anos foram desenvolvidas diferentes técnicas de colorações citológicas, inclusive com técnicas combinadas. Com relação à morfologia espermática, já foi relatado o uso do Nitrato de prata associado a outras técnicas em espécies distintas, exceto em humanos Apesar de existirem protocolos estabelecidos, é indispensável a busca por outros que permitam a melhor visualização das estruturas celulares.
Objetivos
Comparar diferentes técnicas de coloração em espermatozoides humanos para a avaliação morfológica.
Delineamento e Métodos
Estudo experimental. Foram realizados esfregaços de sêmen humano processado em lâminas de microscopia e corados utilizando as seguintes técnicas: Kit Panótico Rápido (Laborclin®), SingleProv (Newprov®) e Nitrato de Prata adaptado de Howell e Black (1980) e associações entre Nitrato de Prata + Panótico , Nitrato de Prata + Single Prov. Para todas as técnicas, foi avaliada a morfologia espermática (100x), proporção de acrossoma, região nuclear e presença de vacúolos.
Resultados
Foi observado que com o uso de Nitrato de Prata, a proporção acrossoma/núcleo foi mais nítida e contrastante comparada com as técnicas de Panótico e Singleprov. Entretanto, associando a técnica de Nitrato de Prata + Panótico e Nitrato de Prata + Singleprov, houve a diminuição da capacidade da diferenciação da relação acrossoma/núcleo. A presença de vacúolos foi observada nas três técnicas utilizadas, exceto nas técnicas associadas.
Conclusões/Considerações Finais
A técnica do Nitrato de Prata é mais complexa comparada a kits rápidos de coloração, porém demonstrou melhor evidência da região acrossomal, o que representa uma vantagem durante as análises de morfologia espermática, cuja visualização é essencial. Assim, a associação do Nitrato de Prata com outras técnicas, como por exemplo a coloração de Giemsa, deve ser considerada para averiguar a eficiência e aplicabilidade deste método.
Referências
ANDRASZEK, K; BANASZEWSKA, D; BIESIADA-DRZAZGA, B. The use of two staining methods for identification of spermatozoon structure in roosters. Poultry Science, [s.l.], v. 97, n. 7, p.2575-2581, 22 jun. 2018. Oxford University Press (OUP).
ANDRASZEK, Katarzyna; SMALEC, Elżbieta. The use of silver nitrate for the identification of spermatozoon structure in selected mammals. Canadian Journal Of Animal Science, [s.l.], v. 91, n. 2, p.239-246, jun. 2011. Canadian Science Publishing.
HOWELL, W. M.; BLACK, D. A.. Controlled silver-staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: a 1-step method. Experientia, [s.l.], v. 36, n. 8, p.1014-1015, ago. 1980. Springer Nature.
Palavras-chave
Nitrato de prata, processamento seminal, morfologia, espermatozoides.
Área
Tema livre
Instituições
Universidade do Vale do Itajaí - UNIVALI - Santa Catarina - Brasil
Autores
Danilo Modafaris Araujo, Yasmin Beatrisse Klein Batel, Jhuly Laurentino Nunes, Andressa Moreira Giusti