Dados do Trabalho

Título

PEPTIDEOS BIOINSPIRADOS EM MASTOPARANOS COM PROPRIEDADES ANTIBACTERIANAS

Fundamentação/Introdução

As terapias atuais para o tratamento de doenças infecciosas apresentam-se ameaçadas devido ao crescente quadro de resistência antibiótica, assim como ao déficit de compostos ou estratégias desenvolvidas para a prática clínica. Dessa forma, os peptídeos antimicrobianos (PAMs) surgiram como uma nova proposta para o desenvolvimento de fármacos, uma vez que estes podem atuar no combate a diversos patógenos humanos. PAMs vêm sendo avaliados acerca de suas atividades contra microrganismos patogênicos, uma vez que atuam contra bactérias susceptíveis e resistentes, assim como em biofilmes. Dentre estes, os mastoparanos demonstram potencial biotecnológico devido às suas propriedades multifuncionais.

Objetivos

Neste trabalho apresentamos dois variantes de mastoparanos desenhados com base em mastoparano-L, visando o aumento do potencial antimicrobiano e redução das propriedades hemolíticas deste.

Delineamento e Métodos

Os peptídeos foram gerados computacionalmente de acordo com o padrão helicoidal e usando o peptídeo mastoparano-L como sequência de entrada para o algoritmo Joker. Foram realizados ensaios de concentração inibitória mínima (CIM) frente a 2 cepas bacterianas de Pseudomonas aeruginosa, PAO1 e PA14. A cepa PAO1 foi selecionada para avaliação da atividade antibiofilme (flow-cell). O potencial hemolítico também foi avaliado.

Resultados

Os ensaios comparativos foram realizados com o peptídeo parental (mastoparano-L), R1 e R4. Os ensaios mostraram atividades inibitórias contra cepas de P. aeruginosa (PAO1 e PA14), com CIMs de 8 μM para mastoparano-L e 4 μM para R1 e R4. Os resultados de flow-cell mostram que os peptídeos R1 e R4 foram capazes de erradicar biofilmes pré-formados na concentração testada de 16 μM. Entretanto, mastoparano-L não mostrou o mesmo potencial de erradicação, levando somente a dispersão das células constituintes do biofilme avaliado. Além disso, os efeitos tóxicos do mastoparan-L em relação às células de mamíferos foram drasticamente reduzidos nas variantes. Foi observado que a 100 μM, mastoparano-L induziu mais de 45% de hemólise, enquanto que R1 e R4 causaram menos de 10% de hemólise nesta mesma concentração.

Conclusões/Considerações Finais

Ao modificar computacionalmente as propriedades físico-químicas de R1 e R4 foram reduzidas suas propriedades hemolíticas, bem como otimizado o potencial terapêutico desses peptídeos in vitro contra cepas e biofilmes de P. aeruginosa.

Palavras-chave

Peptídeo antimicrobiano, mastoparano, biofilme, P. aeruginosa.