Dados do Trabalho

Título

PADRONIZAÇAO DO USO DE RESAZURINA PARA TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE DE PRODUTO NATURAL EM LEVEDURAS

Fundamentação/Introdução

A participação dos fungos na etiologia de infecções fúngicas sistêmicas tem aumentado consideravelmente, mas principalmente em infecções cutâneas (dermatomicoses). As poucas opções de tratamento indicam a necessária busca de alternativas terapêuticas seguras e eficazes. Produtos naturais, como o extrato etanólico de própolis (EP), são promissores por serem fonte de muitas substâncias ativas que podem mostrar vários efeitos terapêuticos, atividade anti-inflamatória e imunomoduladora além de baixo custo, fácil acesso e baixa citotoxicidade. Entretanto, quando se trata de produtos como o EP, há dificuldade na interpretação dos testes de susceptibilidade in vitro devido a turbidez do extrato e formação de resina. Sendo assim, há a necessidade de encontrar alternativas que facilitem a leitura segura desses testes, como o uso de corantes como a resazurina.

Objetivos

Padronizar o uso de resazurina para teste de susceptibilidade usando EP em leveduras planctônicas.

Delineamento e Métodos

A atividade antifúngica do EP foi determinada pela concentração inibitória mínima (CIM) com concentrações variando de 0,001 μg/mL a 0,655 μg/mL testadas em cepas padrão de Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. Adicionou-se 30 µL de resazurina a cada poço em três condições diferentes: 0 horas (hs) de incubação totalizando 48 hs com resazurina (A); após 24 hs de incubação e mais 24 hs com resazurina (B); após 48 hs de incubação, mais 24 hs com resazurina (C). A CIM foi determinada por observação direta do crescimento da colônia e mudança da cor do corante de azul para rosa. A concentração fungicida mínima (CFM) também foi determinada.

Resultados

Observou-se que para todas as espécies de leveduras, os resultados mais reprodutíveis das leituras foram obtidos na condição B. Na condição A, as leituras visuais de crescimento e o corante não coincidiram com a leitura do CFM e na condição C, os resultados das três leituras não coincidiram. Observou-se também que a cor da resazurina não foi alterada pela cor do EP nem pela formação de resina em maiores concentrações do extrato.

Conclusões/Considerações Finais

A resazurina se mostrou eficiente nos testes realizados e pode ser utilizada como metodologia auxiliar para a leitura e interpretação dos testes de suscetibilidade de leveduras com produtos naturais.

Palavras-chave

Candida, própolis, resazurina.