Dados do Trabalho

Título

VALIDAÇAO DE METODO PARA QUANTIFICAÇAO DE CARBAMAZEPINA E ACIDO VALPROICO EM SANGUE CAPILAR COLETADO COM O DISPOSITIVO ONEDRAW

Introdução

Indivíduos que realizam tratamento para epilepsia podem ter dificuldade em aderir ao tratamento. Dentre os motivos pode-se destacar o esquecimento e os efeitos adversos causados pela medicação. Com esse cenário, entende-se que existe uma necessidade de realizar o monitoramento terapêutico de pacientes em tratamento para epilepsia. Está descrita na literatura a dosagem de anticonvulsivantes em sangue capilar seco. O dispositivo OneDraw, que permite obter uma amostra de sangue capilar a partir de sua fixação na parte superior do braço, elimina alguns dos obstáculos encontrados na coleta de sangue capilar pelo dedo, como a dor, desconforto e tempo de espera.

Metodologia/ Discussão

A validação do método seguiu a guia de validação de métodos bioanalíticos do FDA (2018). A seletividade foi avaliada pelo processamento de cinco amostras de DBS de diferentes indivíduos que não fazem o uso de carbamazepina e ácido valpróico; A linearidade foi avaliada através da preparação de curvas de calibração com a presença de carbamazepina e ácido valpróico; A precisão e exatidão foram avaliadas analisando amostras de controle de qualidade baixo, médio e alto; O limite de quantificação foi avaliado através da análise de uma amostra de controle de qualidade no limite inferior de quantificação, por três dias diferentes em triplicata; também foi avaliado o efeito matriz e o impacto do hematócrito na amostra. Um disco de sangue seco em papel Whatman 903 de 6 mm foi extraído com 200 µL de uma mistura de metanol e água (80:20, v/v) contendo padrões internos. As amostras foram deixadas no ultrassom por 5 minutos e foram homogeneizadas por 30 minutos. Após centrifugação, o extrato foi transferido para um vial e injetado no sistema CLAE-EM/EM.

Marco Conceitual/ Fundamentação/ Objetivos

Ainda não foram realizados validação de métodos para quantificação de anticonvulsivantes em amostras de sangue capilar coletadas por este dispositivo. Sendo assim, o objetivo deste trabalho é validar um método em cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (CLAE-EM/EM) para quantificação de carbamazepina (CBZ) e ácido valpróico (AV) em amostras coletadas com o OneDraw.

Resultados/ Conclusões

Foi observado na estabilidade do autoamostrador (12 h) uma variação de -5,21% para o CQB e 0,34% para o CQA, e de 0,91% no CQB e -1,87 no CQA para CBZ e AV, respectivamente. Ainda, a estabilidade analisada por duas semanas permaneceu dentro das variações indicadas. A separação cromatográfica foi realizada em uma coluna Acquity C8 (100 x 2.1 mm; 1,7 µm), com tempo de análise de 8 minutos. O método demonstrou alta sensibilidade para a detecção de CBZ e AV em amostras de sangue capilar. O limite de detecção do método foi de 1,0 mg L-1 para CBZ e 10 mg L-1 para AV. A precisão intra-ensaios foi de 3,29 a 6,75% para a CBZ e 4,67 a 6,54% para o AV. A precisão inter-ensaios foi de 2,47 a 5,78% para CBZ e 3,26 a 6,33% para AV. A exatidão apresentada pelo método foi de 96,13 a 103,60% para CBZ e para o AV 96,71 a 102,42%.

Considerações Finais

Desta forma, um método simples e sensível foi sendo validado para a quantificação CBZ e AV em amostras de sangue capilar coletadas com o dispositivo OneDraw.

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